細胞周期檢測試劑盒

Enzo Life Sciences的CELLESTIAL^® 系列產品涵蓋了廣泛應用于活細胞分析的熒光分子探針，用于要求嚴格的成像應用，如共聚焦顯微鏡、流式細胞儀和高內涵篩選（HCS），具有需要一致性和可重復性。

NUCLEAR-ID^® Green （綠色熒光）和GFP-CERTIFIED^® NUCLEAR-ID^®（紅色熒光）兩款周期分析試劑盒，為通過流式細胞術進行細胞周期進程的誘導和抑制研究提供了一種便捷的方法，且細胞周期檢測結果不受培養時間、溫度、染料和細胞密度影響。可以用于以下方面：

（1）確定給定樣品處于Ｇ0/Ｇ1，Ｓ和Ｇ2/Ｍ 期細胞的百分比，以及細胞凋亡之前定量亞Ｇ1期的百分比。

（2）正常細胞系和表現出多倍性細胞系的活細胞、透性化及固定細胞的 DNA 研究。

本試劑盒可用于約100次的流式細胞儀檢測。使用 Nocodazole 諾考達唑處理的細胞作為對照以檢測細胞周期動力學的變化。活細胞研究也可應用于細胞 DNA 含量的測定、細胞周期增長模式變化的檢測、細胞凋亡監測，以及評估腫瘤細胞變化和抑制基因機制。

◆NUCLEAR-ID^® Green cell cycle kit

ENZ-51014-100

本試劑盒中熒光染料為綠色。不適用于含綠色熒光蛋白或用 FITC 等綠色染料標記的細胞。

●　應用：流式細胞儀，熒光顯微鏡檢測

●　樣品類型：正常細胞系和表現出多倍性細胞系，活細胞、透性化細胞及固定細胞均可

●　儲存溫度： -20°C短期保存，-80°C長期保存

●　試劑盒組分：NUCLEAR-ID^® Green Cell Cycle Detection Reagent, 100 µL

●　試劑盒組分：Nocodazole Control, 10 µL

●　試劑盒組分：10×Assay Buffer, 15 mL

特點

●　染色方法簡便，加入染料后直接通過流式細胞儀分析（100 tests）

●　激發光波長 488 nm，發射光波長 530 nm，顯示為綠色熒光

●　不需要細胞打孔或 RNA 酶處理

●　結果不受細胞周期培養時間、溫度、染料和細胞密度影響

●　從活的或固定細胞中讀取 DNA 內容信息

●　監測由藥物治療或其他干擾引起的細胞周期動力學的變化采用大范圍的細胞密度進行性能驗證

◆NUCLEAR-ID^® Red cell cycle kit (GFP-CERTIFIED^®）

ENZ-51008-100

本試劑盒中熒光染料為紅色。對于含綠色熒光蛋白或用FITC等綠色染料標記的細胞同樣適用。

●　應用：流式細胞儀，熒光顯微鏡檢測

●　樣品類型：正常細胞系和表現出多倍性細胞系，活細胞、透性化細胞及固定細胞均可

●　儲存溫度： -20°C短期保存，-80°C長期保存

●　試劑盒組分：NUCLEAR-ID^® Red Cell Cycle Detection Reagent, 200 µL

●　試劑盒組分：Nocodazole Control, 10 µL

●　試劑盒組分：10×Assay Buffer, 15 mL

特點

●　可檢測活細胞，固定細胞和透化的細胞中 DNA 含量信息的完整試劑盒

●　穩定且高純度的紅色熒光染料

●　采用不同細胞密度進行性能驗證

●　無需 RNase 處理

●　可檢測藥物處理或者其他因素引起的細胞周期變化

●　無需 UV 激發

●　無光漂白效應

●　可與其他探針與染料一同使用

●　制造嚴格、消除非特異性檢測偽影

●　兼容 GFP 綠色熒光蛋白及 FITC

Figure 1: 使用結構化照明方法，綠色熒光蛋白表達（GFP表達）線粒體和細胞核之間的空間關系的三維重建

Figure 2: Drug treatments with live cells inhibit cell cycle progression at different phases.

活細胞藥物治療抑制不同階段的細胞周期進程。

NUCLEAR-ID^® Red DNA Stain 與其他染料的比較

實驗操作

A. 用NUCLEAR-ID^® 紅色染料進行細胞染色后，使用流式細胞儀進行細胞周期 DNA 分析

1.　使用（或不使用）實驗化合物處理細胞。試管中懸浮細胞液濃度低于5×10⁵ / mL。

2.　選擇介質或普通細胞培養緩沖液與 NUCLEAR-ID^® 紅色 DNA 染色溶液混合。

3.　推薦使用 NUCLEAR-ID^® 紅色 DNA 染色溶液的250倍至500倍稀釋液進行活細胞周期 DNA 分析（終濃度分別為40 μM至20 μM）。

4.　將細胞重懸于 0.5 mL 新稀釋的染色溶液中。

5.　輕輕混合后，室溫或37℃下孵育15-30分鐘。

6.　直接用流式細胞儀分析細胞而無需進一步處理或洗滌。

7.　488 nm 激發激光分析樣品使用流式細胞儀 PerCPCy5.5 或 FL3 通道檢測。對于 633 nm 激發，選用適當的收集過濾器 > 700 nm，FL4 

      或 FL5，APC-Cy7 通道。

B. 經NUCLEAR-ID^® 紅色染料染色的活細胞用熒光/共聚焦顯微鏡觀察細胞核變化

1.　貼壁細胞：在含有適當培養基的培養皿內的蓋玻片上培養貼壁細胞。當細胞達到所需的數量時，小心地除去培養基并稀釋到（~100 μL）2000

      倍至 4000 倍（在選擇培養基或緩沖液中）使 NUCLEAR-ID^® 紅色 DNA 染料能夠（終濃度分別為 5.0 μM 至 2.5 μM）覆蓋到單層細胞。

      懸浮細胞：室溫（RT）下以 400× 離心5分鐘獲得細胞懸浮液。小心吸除上清液，并進行 2000-4000 倍稀釋（在選擇培養基或緩沖液中）

      使 NUCLEAR-ID^® 紅色 DNA 染料能夠（終濃度分別為 5.0 μM 至 2.5 μM）覆蓋到單層細胞。

2.　樣品避光保存，并在37°C孵化15-30分鐘。

3.　用 100 μL 緩沖液（如 PBS）洗滌細胞。去除多余的緩沖液，將蓋玻片放在載玻片上。使用廣角熒光或共焦顯微鏡（推薦放大 60 倍）觀察染色

      后的細胞。使用標準羅丹明或德克薩斯紅色過濾器集成像系統。

相關產品資料請點擊下載：活細胞熒光分析 Ver.3

※ 本頁面產品僅供研究用。研究以外不可使用。