LBIS^® 抗dsDNA-小鼠ELISA試劑盒

LBIS^® Mouse Anti-dsDNA ELISA Kit

　　近年來(lái)研究人員多通過(guò)使用與人具有同樣的自身免疫性疾病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自然發(fā)病和人為使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)癥的方式來(lái)研究自身免疫性疾病的機(jī)制闡明和新型藥物開發(fā)。自然發(fā)病系統(tǒng)代表的MRL/lpr小鼠被應(yīng)用到很多實(shí)驗(yàn)。MRL/lpr小鼠在淋巴結(jié)腫瘤發(fā)病同時(shí)伴隨著腎炎、血管炎、關(guān)節(jié)炎的高機(jī)率發(fā)病，對(duì)包含慢性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）模型的自身免疫性疾病發(fā)病機(jī)制的闡明，可作為有效的模型進(jìn)行研究。MRL/lpr小鼠血清中被檢測(cè)出自身抗體有IgG型類風(fēng)濕因子（RF）、IgM型類風(fēng)濕因子（RF）、抗ssDNA 抗體、抗dsDNA 抗體、抗Sm 抗體。

　　通過(guò)使用該疾病動(dòng)物血清中自身抗體含量做標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過(guò)單位轉(zhuǎn)換，可進(jìn)行測(cè)量之間數(shù)值的比較。

　　LBIS^® 抗dsDNA-小鼠ELISA試劑盒采用了測(cè)定小鼠抗dsDNA 抗體濃度的夾心酶聯(lián)免疫測(cè)定法。

　　此試劑盒僅限研究使用。

◆特點(diǎn)

●　全反應(yīng)時(shí)間是4小時(shí)20分鐘。

●　測(cè)定小鼠血清或者血漿（肝素血漿除外）中的抗dsDNA 抗體濃度。

●　可測(cè)定微量樣本（標(biāo)準(zhǔn)操作法是5 μL）。

●　1個(gè)試劑盒可做96孔。

●　標(biāo)準(zhǔn)品是小鼠源。

●　全部試劑均為液體。

試劑盒的保存和使用期限

　　試劑盒在2-8℃保存。此保存條件下，有效期（記載在外箱標(biāo)簽）內(nèi)試劑盒是穩(wěn)定的。開封的試劑對(duì)應(yīng)保存狀態(tài)可能會(huì)受到影響，請(qǐng)盡早使用。

◆測(cè)定原理

　　本試劑盒是標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋樣本在抗原包被的微孔板中進(jìn)行孵育處理。孵育2小時(shí)后清洗，加入過(guò)氧化物酶結(jié)合抗小鼠IgG抗體，與捕捉的抗體孵育2小時(shí)。清洗后，顯色劑（TMB）與孔中殘留的過(guò)氧化物酶反應(yīng)。添加酸性溶液可終止反應(yīng)。反應(yīng)生成的黃色產(chǎn)物在450 nm處（副波長(zhǎng)620 nm）測(cè)定。吸光度與抗小鼠dsDNA 抗體濃度成正比。標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)應(yīng)吸光度可制作成標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得未知樣本濃度。

◆試劑盒組成

※根據(jù)批次不同，數(shù)值有差異。

◆所需必要設(shè)備

●　蒸餾水。

●　標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋用試管。

●　清洗液（稀釋用溶液）用玻璃器具。（量筒·瓶）

●　槍頭交換式移液器。（一次性槍頭5 μL正規(guī)的移液槍，以及50-450 μL正規(guī)的移液槍）

●　連續(xù)分裝移液槍。（例：Eppendorf 的multipette plus、可進(jìn)行100 μL連續(xù)分裝的儀器。）

●　紙巾等吸水性物品。（清洗后去除板上殘留液體）

●　攪拌器。（Vortex類型）

●　96孔板用振蕩器。（約800 rpm）

●　96孔板用清洗機(jī)（若有是最好）或者注射瓶。

●　96孔板酶標(biāo)儀。（450 ±10 nm 、620 nm：600～650 nm）

●　數(shù)據(jù)分析用軟件。（若有是最好）

◆試劑盒性能

●　測(cè)定范圍

●　小鼠抗dsDNA 抗體檢測(cè)范圍在15.6-1000 mU/mL內(nèi)。

●　特異性

●　本ELISA系統(tǒng)使用的標(biāo)識(shí)抗體對(duì)抗小鼠IgG抗體具有特異性。

●　與小鼠IgM的反應(yīng)交差性在檢測(cè)靈敏度以下。

●　精密度實(shí)驗(yàn)

●　①批次變動(dòng)（N=30）平均C.V.值是4.2%

●　②日差可重復(fù)性實(shí)驗(yàn)（N=30、3天）平均C.V.值是4.7%

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